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PCR產(chǎn)物/凝膠回收純化試劑盒

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¥ 240

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柱式法PCR產(chǎn)物凝膠回收純化試劑盒說明書

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215K

01

SN215 216PCR產(chǎn)物凝膠回收純化試劑盒流程圖

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常見問題

一:(DNA)植物樣本處理量不確定問題的解決方案

對(duì)于植物樣本,樣本處理量無法統(tǒng)一確定,對(duì)于一般樣本(煙草,擬南芥等),提取量不超過100mg鮮重組織或者20mg干重組織,對(duì)于復(fù)雜樣本(水稻,玉米,榆樹等),建議初始樣本量不超過50mg鮮重或者10mg干重組織;如果需要較高的DNA量,可以采取多管濃縮的方法提取DNA;

二:(DNA)如何處理短時(shí)間內(nèi)無法低溫處理的DNA樣本?

對(duì)于植物樣本,如果短時(shí)間不能低溫處理,建議使用硅膠顆粒干燥樣本,防止DNA嚴(yán)重降解;研磨處理材料過程中盡量不要過量,否則會(huì)導(dǎo)致DNA產(chǎn)量低;材料過量也會(huì)使樣本出現(xiàn)團(tuán)塊無法裂解,導(dǎo)致離心柱堵塞,無法獲得高質(zhì)量DNA;

三:DNA提取中A260/280比值波動(dòng)是什么原因

對(duì)于基因組DNA提取,A260/280值如果低于1.7說明有可能存在蛋白污染,如果值大于1.9,說明可能存在RNA污染;如果洗脫樣本時(shí)沒有使用Buffer EB,而使用ddH20,比值或偏低,因?yàn)?/strong>Ph值會(huì)影響吸光值,并不表示樣本純度低;

四:(DNA)離心柱漂洗完成后需要注意什么

離心柱漂洗完成后,盡可能烘干柱膜上殘留乙醇,殘留乙醇會(huì)影響洗脫效率和下游實(shí)驗(yàn)效果;如果A260/230值過低,說明樣本提取過程中,漂洗不徹底,有鹽離子殘留,建議增加漂洗次數(shù);

五:(DNA)試劑盒中Buffer EB含微量EDTA怎樣處理

試劑盒中Buffer EB中含有少量EDTA,可能影響下游實(shí)驗(yàn),使用時(shí)適當(dāng)稀釋,如果用其他洗脫液洗脫,要確保PH>7.5PH過低影響洗脫效率。

六:(DNA)基因組DNA樣本儲(chǔ)存需要注意什么

待提取樣本盡量避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致提取的DNA片段降解或者DNA得率嚴(yán)重下降。

七:血液樣本DNA提取注意事項(xiàng)

對(duì)于血液樣本,最好使用新鮮血液樣本或者4℃存放少于2天的樣本,否則會(huì)嚴(yán)重降低DNA產(chǎn)量;盡量避免反復(fù)凍融(不超過3-5次),每一次凍融都會(huì)降低DNA得率;

如果樣本中含有血塊,說明樣本收集時(shí)未加入血液抗凝劑;建議重新收集樣本并加入EDTA,肝素,檸檬酸等抗凝;在使用紅細(xì)胞裂解液處理血液時(shí),確保血液樣本已經(jīng)恢復(fù)到室溫狀態(tài);處理過程中盡可能混勻樣本,防止紅細(xì)胞裂解不完全;

八:植物樣本DNA提取注意事項(xiàng)(一)

  對(duì)于植物樣本,樣本處理量無法統(tǒng)一確定,對(duì)于一般樣本(煙草,擬南芥等),提取量不超過100mg鮮重組織或者20mg干重組織,對(duì)于復(fù)雜樣本(水稻,玉米,榆樹等),建議初始樣本量不超過50mg鮮重或者10mg干重組織;如果需要較高的DNA量,可以采取多管濃縮的方法提取DNA;

       

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